近岸蛋白 Novoprotein E. coli Poly(A) Polymerase 加尾试剂盒 M012-01A

促销价：

￥300.00

品牌：

近岸蛋白 Novoprotein

CAS号：

计量单位：

支

货号：

M012-01A

生产日期：

有效日期：

2025-02-28

是否临期：

非临期产品

库存数量:

5(支)

购买数量：

云南腾善生物科技有限公司

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产品详情

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产品描述

Poly (A) 聚合酶是从重组菌株E.coli中分离得到，可以催化ATP以AMP的形式依次掺入到RNA的3´末端，即在RNA的3´末端加多聚A尾。Poly (A) 聚合酶具有很高的加尾效率，可以在RNA的3´末端加入20~200个A碱基。聚腺苷酸化提高了RNA在细胞中的稳定性，增强了转染或显微注射后RNA的表达效率。Poly(A)尾在某些应用中可作为第一链cDNA合成的引物结合位点，并可用于末端标记或定量miRNA。

产品用途

1) 用于RNA 3´末端标记；
2) 为RNA添加Poly(A)尾，用于克隆或亲和纯化。如将miRNA添加Poly (A)，为cDNA合成提供oligo-dT引物结合位点；
3) 提高RNA在真核细胞中的翻译效率

保存条件

-20℃。

活性定义

在37℃条件下，10 min内将1 nmol AMP掺入到RNA所需的酶量定义为1个活性单位（U）。

质量控制

无大肠杆菌DNA残留、无核酸内、外切酶残留及RNA酶残留。

注意事项

1. 该酶只能以RNA为底物；
2. 该酶将AMP添加到RNA的3´末端具有较高的选择性，并不会在所有RNA分子中添加相同长度的Poly (A)；
3. 该酶需要Mg2+等二价阳离子才具有活性；
4. RNA加A尾长度受酶量、ATP和反应时间等因素影响，不同的实验需要加A的量会有所不同，可通过控制反应时间及酶量来调整加A的长度，该酶在37°C反应30分钟时可加约30个A碱基，1小时可加约100个A碱基；
5. 该酶使用M-MuLV逆转录酶反应缓冲液，也可以进行反应；
6. EDTA抑制该酶活性。若停止反应，可通过添加EDTA至终浓度10mM，或直接对反应体系进行纯化；
7. 加尾结束后，在转染细胞或显微注射前，必须对RNA进行纯化，具体纯化方式见操作流程。