储存条件
4ºC 保存,一年有效;-20ºC 保存,二年有效;
产品特色
即开即用,方便省时;
无血清成分,化学成分明确;
快速冷冻,可直接置于-80℃冰箱冷冻;
高复苏活率,有效保护细胞;
冻存操作步骤
1、收集对数生长期的悬浮细胞或贴壁细胞;
(※冻存对数增殖期的细胞,是可以确保细胞良好生存率中最重要的一点。)
2、使用部分细胞用台盼蓝染色并计数细胞数量;
3、将需要冻存的细胞转移到离心管中,1000rmp,5 分钟离心收集培养的细胞沉淀,彻底弃
去离心管中的上清液;
4、加入适量的细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度约为 5x105-1x107/ml 轻柔地混匀细胞,
制成细胞混合悬液;
5、将加有冻存液的细胞混合悬液分装至 1ml 或 1.5ml 冻存管中;
(※下面的操作步骤尽可能快速完成。另外,冻存液从冷藏柜取出后,尽快进行保存处理 。)
6、无需预冷细胞混合悬液,直接置于-80℃下保存;
7、如果细胞混合悬液要保存液氮时,先在-80℃保存 12 小时(超过一晚),待状态稳定后
在移至液氮中保存。
冻存细胞复苏步骤
1、在 37℃恒温箱(或者水浴锅)等设备中解冻细胞,确认细胞液完全融解。
(※此操作需迅速进行。因为细胞在解冻过程过极易受到损坏)
2、 待冻存管中细胞混合液完全融化后,立即加入 1ml 细胞培养基于冷冻管中与细胞混合,
将其中的混合液移至含有约 5ml 该细胞培养基的离心管中,1000rmp,5 分钟离心收集冻
存细胞沉淀,移去上清液(操作时小心,切勿将细胞沉淀移去)。
3、加入适量的新鲜细胞培养基,使用移液管缓缓加入到细胞沉淀,轻柔地混匀,将细胞混
合液移至事先准备好的培养容器中。
无菌检测
内毒素:生色底物法
支原体:荧光抗体法